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種子活力測定方法有哪些?一共有幾種?

分類:技術文章 閱讀:4212次 時間:2024-08-21

       種子活力是衡量種子質量的重要指標,種子活力強,才能發好芽,長出作物,那么種子活力測定方法有哪些?種子活力測定方法一般有以下幾種:氯化三苯基四氮唑法(TTC法)、溴麝香草酚藍法(BTB法)、靛紅染色法、碘化鉀反應法、剝胚法、紙上熒光法、抗冷法、低溫法、電導法、加速衰老法。本文就給大家詳細介紹以上幾種種子活力測定方法。

 

       (一)氯化三苯基四氮唑法( TTC)
       1.將種子用溫水(約30℃)浸泡2--6小時,使種子充分吸脹。
       2.隨機取種子100粒,紅花、蓖麻等具有外殼的需要去掉外殼,豆類種子要去皮。然后沿種胚中央準確切開,取一半備用。
       3.將準備好的種子浸于2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)溶液中,于恒溫箱( 30~35℃)中保溫30分鐘。
       4.染色結束后要立即進行鑒定,因放久會褪色。倒出TTC溶液,再用清水將種子沖洗1--2次,觀察種胚被染色的情況,凡種胚全部或部分被染成紅色的即為具有生命力的種子,種胚不被染色的為死種子。如果種胚中非關鍵性部位(如子葉的一部分)被染色,而胚根或胚芽的尖端不染色,都屬于不能正常發芽的種子。

 

       (二)溴麝香草酚藍法(BTB法)
       1.浸種:同上述 TTC 法。
       2.BTB 瓊脂凝膠的制備:取 0.1% BTB 溶液 100 mL 置于燒杯中,將 1 g 瓊脂剪碎后加入,用小火加熱并不斷攪拌。待瓊脂完全溶解后,趁熱倒在 4 個干潔的培養皿中,使成一均勻的薄層,冷卻后備用。
       3.顯色:取吸脹的種子 200 粒,整齊地埋于準備好的瓊脂凝膠培養皿中,種子胚朝下平放,間隔距離至少 l cm 。然后將培養皿置于 30 ~ 35 ℃下培養 1 ~ 2 小時,在藍色背景下觀察,如種胚附近呈現較深黃色暈圈是活種子,否則是死種子。
       4.計算活種子百分率。
       用沸水殺死的種子作同樣處理,進行對比觀察。

 

       (三)靛紅染色法
       步驟同TTC染色法。
       注意事項
       1.染料的濃度要適當,染色時間不能太長(如用紅墨水染色,只需要5~10分鐘即可),否則不容易區別染色與否。
       2.靛紅染色法測定種子生活力,適用于豆類、麻類、瓜類、十字花科、果樹、喬灌木種子的生活力測定。

 

       (四)碘化鉀反應法
       1.將種子在水中浸18小時。
       2.取出種子放在墊有濕濾紙的培養皿內,將培養皿置30℃恒溫箱中,不同植物種子放置時間不同,如松種子放48小時,落葉松放72小時。
       3.用刀片把胚部切下,然后浸入碘碘化鉀溶液中20--30分鐘后,取出胚用水沖洗12分鐘,然后在墊有白紙的玻璃板上進行觀察。
       4.鑒別種子生活力的標準是:有生活力的種子的胚部全部染成不同程度的黑色或灰色,或者胚根部呈褐色,子葉為黃色。無生活力種子的胚部全部染成黃色,或子葉呈灰色或黑色,胚根呈黃色,或胚根末端呈黑色或灰色,而其他部分呈黃色。
       5.此法適于松屬、云杉屬和落葉松屬的種子生活力測定。

 

       (五)剝胚法
       將種子在清水中浸泡24小時,使種皮軟化,切開種皮,有胚乳的種子,還須將胚乳切開,用解剖刀和解剖針小心地取出胚。放在鋪有濕潤濾紙的培養皿內,每皿50粒,重復一次,放在20--25℃的溫箱中,經2~10天后即可觀察胚的生長情況。有生活力的胚在這段時間仍然堅實而呈白色,開始生長或轉變為綠色;而死胚則變色腐爛。離體胚測定和TTC法測定一樣比普通測定要快,但取胚時胚較易受傷。該法適于測定長度大于5mm種子的生活力。

 

       (六)熒光法
       1.直接觀察法這種方法適用于禾谷類、松柏類及某些薔薇科果樹的種子生命力的鑒定,但種間的差異較大。用刀片沿種子的中心線將種子切為兩半,使其切面向上放在無熒光的白紙上,置于紫外光燈下照射并進行觀察、記載。有生活力的種子在紫外光的照射下將產生明亮的藍色、藍紫色或藍綠色的熒光;喪失生命力的死種子在紫外光照射下多呈黃色、褐色以至暗淡無光,并帶有多種斑點。
       隨機選取20粒待測種子,按上述方法進行觀察并記載有生活力及喪失生活力的種子的數目,然后計算有生活力種子所占百分數。與此同時也作一平行的常規發芽試驗,計算其發芽率作為對照。
       2.紙上熒光隨機選取50粒完整無損的種子,置燒杯內加蒸餾水浸泡10~15分鐘令種子吸脹,然后將種子瀝干,再按0.5cm的距離擺放在濕濾紙上(濾紙上水分不宜過多,防止熒光物質流散),以培養皿覆蓋靜置數小時后將濾紙(或連同上面擺放的種子)風干(或用電吹風吹干)。置紫外光燈下照射,可以看到擺過死種子的周圍有一圈明亮的熒光團,而具有生活力的種子周圍則無此現象。根據濾紙上顯現的熒光團的數目就可以測出喪失生活力的種子的數量,并由此計算出有生活力種子所占的百分率。此外,可與此同時作一平行的常規種子萌發試驗,計算其發芽率作為對照。
       這個方法應用于白菜、蘿卜等十字花科植物種子生命力的鑒定效果好。但不適用衰老、死亡后減弱或失去熒光的種子,因此,對它們只宜采用直接觀察法。
       實訓結果記錄分析:一般的種子可全部剝皮,取出種仁。發現的空粒、腐壞粒和病蟲害粒記入表格。剝出的種仁先放人盛有清水的器皿中,待一個重復全部剝完后再一起放入染液中,使溶液淹沒種仁,上浮者要壓沉。

 

       (七)抗冷法
       1.將種子按普通發芽試驗方法置床,每個樣品重復4次。然后在10℃、黑暗條件下處理7天后,移至適宜溫度下,交替光照培養6天,凡正常幼苗作為高活力種子。
       2.抗冷測定主要適用于春播喜溫作物,是在發芽試驗前或發芽試驗期間將種子置于低溫和潮濕的土壤中經一定時間的處理后,移至適宜溫度下生長,模擬早春田間逆境條件,觀察種子發芽成苗的能力。

 

       (八)低溫法
       1.取試樣200粒或400粒,分4次重復,用紗布包好,寫好標簽,放入冷水中(3~6℃)浸泡一定時間,然后取出進行標準發芽試驗,測定種子發芽勢、發芽率、發芽指數和活力指數。
       2.此法是將種子浸泡在低溫水中,因此,種子會受到吸脹冷害、吸脹損傷及缺氧的損害,活力低的種子經過一定時間的處理后就會喪失發芽力,而活力高的種子由于抗逆性強仍能保持其發芽力。冷浸后所測得的指標能較好地反映種子活力的高低。

 

       (九)電導法
       1.取試樣兩份各50粒種子,稱重至小數兩位,然后放入燒杯內,用量筒向各燒杯加入250ml無離子水,另一燒杯加無離子水為對照,于20℃浸泡24h,然后用電導儀測定浸出液的電導率。
       2.高活力種子細胞膜完整性好,浸入水中后滲出的可溶性物質和電解質少,浸泡液的電導率低;反之,低活力的種子細胞膜完整性差,浸泡時就會使細胞內的可溶性物質外滲,浸泡液的電導率高。

 

       (十)加速衰老法
       將200粒種子置于老化盒內的支架網上鋪平,箱內加水,水面距支架6~8cm,然后加蓋密封,置于規定溫度(40~50℃)的種子老化箱內,經48~72h處理。期間,恒溫箱也保持密閉。老化處理結束后將種子風干進行標準發芽試驗,將長成正常幼苗的種子作為高活力種子。



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